Амидаза (AMD)
Ензими:Су макромолекуларни биолошки катализатори, већина ензима су протеини
Амидаза:Катализују хидролизу различитих ендогених и страних алифатичних и ароматичних амида преносом ацил групе у воду уз производњу слободних киселина и амонијака. Хидроксамске киселине и друге органске киселине се широко користе као лекови јер су састојци фактора раста, антибиотика и инхибитора тумора. Амидазе се могу поделити на ацилазе типа R и типа S према стереоселективности катализатора.
Поред катализације хидролизе амида, амидаза такође може катализовати реакције преноса ацилних група у присуству ко-супстрата као што је хидроксиламин.
Амидазе различитих извора имају различиту специфичност супстрата, неке од њих могу хидролизовати само ароматичне амиде, неке од њих могу хидролизовати само алифатичне амиде, а неке хидролизују α- или ω-амино амиде. Већина амина има добру каталитичку активност само за ацикличне или једноставне ароматичне амиде, али за сложене ароматичне, хетероциклични амиди, посебно амиди са орто супституентима, генерално су ниске активности (само неколико ензима показује боље каталитичке ефекте).
Каталитички механизам:
| Ензими | Шифра производа | Шифра производа |
| Ензимски прах | ЕС-АМД-101~ ЕС-АМД-119 | сет од 19 амидаза, по 50 мг, 19 артикала * 50 мг / артикало, или друга количина |
| Комплет за скрининг (SynKit) | ES-AMD-1900 | сет од 19 амидаза, по 1 мг свака 19 артикала * 1 мг / артикал |
★ Висока специфичност супстрата.
★ Јака кирална селективност.
★ Висока ефикасност конверзије.
★ Мање нуспроизвода.
★ Благи услови реакције.
★ Еколошки прихватљиво.
➢ Скрининг ензима треба спровести за специфичне супстрате због специфичности супстрата, и добити ензим који катализује циљни супстрат са најбољим каталитичким ефектом.
➢ Никада не контактирајте са екстремним условима као што су: висока температура, висок/низак pH и органски растварачи високе концентрације.
➢ Нормално, реакциони систем треба да садржи супстрат, пуферски раствор (оптимални pH реакције ензима). Косупстрати као што је хидроксиламин треба да буду присутни у реакционом систему преноса ацилне групе.
➢ AMD треба додати последњи у реакциони систем са оптималним pH и температуром реакције.
➢ Све врсте AMD имају различите оптималне услове реакције, тако да сваку од њих треба даље проучити појединачно.
Пример 1(1):
Активност хидролизе на различите амидне супстрате
| Подлога | Специфична активност μmol min-1mg-1 | Подлога | Специфична активност μmol min-1mg-1 |
| Ацетамид | 3,8 | ο-OH бензамид | 1.4 |
| Пропионамид | 3,9 | p-OH бензамид | 1.2 |
| Лактамид | 12,8 | ο-НХ2бензамид | 1.0 |
| Бутирамид | 11,9 | p-НХ2бензамид | 0,8 |
| Изобутирамид | 26.2 | ο-Толуамид | 0,3 |
| Пентанамид | 22,0 | p-Толуамид | 8.1 |
| Хексанамид | 6.4 | Никотинамид | 1,7 |
| Циклохексанамид | 19,5 | Изоникотинамид | 1,8 |
| Акриламид | 10.2 | Пиколинамид | 2.1 |
| Метакриламид | 3,5 | 3-фенилпропионамид | 7.6 |
| Пролинамид | 3.4 | Индол-3-ацетамид | 1,9 |
| Бензамид | 6,8 |
Реакција је спроведена у 50 mM раствору натријум фосфатног пуфера, pH 7,5, на 70 ℃.
| Амиди | Хидроксиламин | Хидразин |
| Ацетамид | 8.4 | 1.4 |
| Пропионамид | 18,4 | 3.0 |
| Изобутирамид | 25,0 | 22,7 |
| Бензамид | 9.2 | 6.1 |
Реакција је спроведена у 50 mM раствору натријум фосфатног пуфера, pH 7,5, на 70 ℃.
Повезана концентрација реагенса: амиди, 100 mM (бензамид, 10 mM); хидроксиламин и хидразин, 400 mM; ензим 0,9 μM.
Пример 2(2):
Пример 3(3):
1. Д'Абусцо АС, Аммендола С., ет ал. Ектремопхилес, 2001, 5:183-192.
2. Гуо ФМ, Ву ЈП, Јанг ЛР и др. Процесна биохемија, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Женг Р.Ц., Ђин Џ.К., Ву З.М. и др. Биоорганска хемија, 2017, доступно онлајн 7.
