амидаза (АМД)
ензими:Макромолекуларни биолошки катализатори, већина ензима су протеини
амидаза:Катализују хидролизу различитих ендогених и страних алифатичних и ароматичних амида преношењем ацил групе у воду уз производњу слободних киселина и амонијака.Хидроксаминске киселине и друге органске киселине се широко користе као лекови јер су састојци фактора раста, антибиотика и инхибитора тумора.Амидазе се могу поделити на ацилазе Р типа и С типа према стереоселективности катализатора.
Осим што катализује хидролизу амида, амидаза такође може катализовати реакције ацил трансфера у присуству ко-супстрата као што је хидроксиламин.
Амидазе са различитим изворима имају различите специфичности супстрата, неке од њих могу само да хидролизују ароматичне амиде, неке од њих могу само да хидролизују алифатичне амиде, а неке хидролизују α- или ω-амино амиде.Већина амина има добру каталитичку активност само за ацикличне или једноставне ароматичне амиде, али за сложене ароматике, хетероциклични амиди, посебно амиди са орто супституентима, су генерално ниске активности (само неколико ензима испољава боље каталитичке ефекте).
Каталитички механизам:
Ензими | Шифра производа | Шифра производа |
Ензимски прах | ЕС-АМД-101~ ЕС-АМД-119 | сет од 19 амидаза, 50 мг свака 19 артикала * 50 мг / комад, или друга количина |
Комплет за скрининг (СинКит) | ЕС-АМД-1900 | сет од 19 амидаза, 1 мг сваки 19 ставки * 1мг / ком |
★ Висока специфичност супстрата.
★ Јака хирална селективност.
★ Висока ефикасност конверзије.
★ Мање нуспроизвода.
★ Благи услови реакције.
★ Еколошки прихватљиво.
➢ Ензимски скрининг треба извршити за специфичне супстрате због специфичности супстрата и добити ензим који катализује циљни супстрат са најбољим каталитичким ефектом.
➢ Никада немојте доћи у контакт са екстремним условима као што су: висока температура, висок/низак пХ и органски растварач високе концентрације.
➢ Нормално, реакциони систем треба да укључује супстрат, пуферски раствор (оптимални реакциони пХ ензима).Ко-супстрати као што је хидроксиламин треба да буду присутни у реакционом систему ацил трансфера.
➢ АМД треба додати последњи у реакциони систем са оптималним пХ и температуром реакције.
➢ Све врсте АМД-а имају различите оптималне услове реакције, тако да сваки од њих треба даље проучавати појединачно.
Пример 1(1):
Активност хидролизе на различите амидне супстрате
Супстрат | Специфична активност μмол мин-1mg-1 | Супстрат | Специфична активност μмол мин-1mg-1 |
Ацетамиде | 3.8 | ο-ОХ бензамид | 1.4 |
пропионамид | 3.9 | p-ОХ бензамид | 1.2 |
Лактамид | 12.8 | ο-НХ2бензамид | 1.0 |
Бутирамиде | 11.9 | p-НХ2бензамид | 0.8 |
Изобутирамид | 26.2 | ο-Толуамид | 0.3 |
пентанамид | 22.0 | p-Толуамид | 8.1 |
Хексанамид | 6.4 | никотинамид | 1.7 |
Цицлохеканамиде | 19.5 | изоникотинамид | 1.8 |
Ацриламиде | 10.2 | Пицолинамиде | 2.1 |
Метацриламиде | 3.5 | 3-Пхенилпропионамид | 7.6 |
Пролинамид | 3.4 | Индол-3-ацетамид | 1.9 |
Бензамиде | 6.8 |
Реакција је изведена у 50 мМ раствору пуфера натријум фосфата, пХ 7,5, на 70 ℃.
Амиди | Хидроксиламин | Хидразин |
Ацетамиде | 8.4 | 1.4 |
пропионамид | 18.4 | 3.0 |
Изобутирамид | 25.0 | 22.7 |
Бензамиде | 9.2 | 6.1 |
Реакција је изведена у 50 мМ раствору пуфера натријум фосфата, пХ 7,5, на 70 ℃.
Повезана концентрација реагенса: амиди, 100 мМ (бензамид, 10 мМ);хидроксиламин и хидразин, 400 мМ;ензим 0,9 μМ.
Пример 2(2):
Пример 3(3):
1. Д'Абусцо АС, Аммендола С., ет ал.Ектремопхилес, 2001, 5:183-192.
2. Гуо ФМ, Ву ЈП, Ианг ЛР, ет ал.Процесс Биоцхемистри, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Зхенг РЦ, Јин ЈК, Ву ЗМ, ет ал.Биоорганска хемија, 2017, доступно на мрежи 7.